靶向人RIP RNAi真核表达载体构建及在人肝癌细胞Huh7细胞中的表达

• 作者: 吴鹏 孙竞 李晓强 龚克
• 来源期刊: 湖北医药学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: RIP siRNA 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 干扰RNA专题
• 页码范围: 112-115
• 分类号: R735.7
• 字数: 2433字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建靶向人RIP的小分子干扰RNA(siRNA)真核表达载体(pSUPERpuro-RIP),在Huh7细胞系中瞬时表达后,检测其对RIP的沉默效果.方法:设计4对含RIP mRNA特异性序列的60 nt DNA链,通过基因克隆技术将其插入真核表达载体pSUPER-puro,构建重组pSUERpuro-RIP siRNA载体,以EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切及测序验证其正确性.再瞬时转染Huh7细胞,Western blot检测RIP蛋白表达.结果:酶切测序证实载体构建成功,无碱基突变.Western blot结果表明pSUPERpuro-RIP siRNA在Huh7细胞系中有较好的沉默效果.结论:成功构建了靶向人RIP基因的siRNA载体pSUPERpuro-RIP siRNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓强	湖北医药学院附属太和医院检验部	19	79	6.0	7.0
2	吴鹏	湖北医药学院附属太和医院检验部	7	22	3.0	4.0
3	孙竞	湖北医药学院附属太和医院检验部	6	38	3.0	6.0
4	龚克	武汉大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0