新型shRNA慢病毒载体抑制TGIF表达及对TGF-β通路的调节

• 作者: 俞光荣 张明珠 王丹 赵有光
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 可诱导慢病毒shRNA栽体 TGIF TGF-β信号通路 Tet-on系统
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-4
• 分类号: Q782
• 字数: 2685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0392.2011.04.001

摘要

目的 构建针对同源域蛋白TGIF(5′-TG-3′interacting factor)可诱导表达shRNA的慢病毒载体,鉴定其在大肠癌细胞系DLD1中对TGIF的基因沉默效率,进一步研究其对TGF-β信号通路下游基因的影响.方法 设计并合成针对TGIF的RNA干扰序列,克隆到可被强力霉素诱导的新型Tet-on慢病毒载体,将慢病毒颗粒感染大肠癌细胞系DLD1细胞.培养并分离细胞克隆后,使用强力霉素(doxcycline)进行诱导,用Real-Time PCR和Western印迹法检测TGIF和PAI-1的表达情况.结果 构建了针对TGIF可诱导shRNA的真核表达病毒载体并获得相应的病毒,病毒可以高效感染大肠癌细胞系DLD1.在强力霉素诱导下,TGIF在DLD1细胞系的表达得到有效抑制,TGF-β下游基因PAI-1和p15表达明显升高.结论本研究成功构建了可诱导表达shRNA慢病毒载体,其在强力霉素诱导下可以有效抑制TGIF在大肠癌细胞系内的表达；TGIF可以抑制TGF-β信号传导通路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞光荣	同济大学附属同济医院骨科	307	4545	34.0	51.0
2	张明珠	同济大学附属同济医院骨科	17	83	6.0	8.0
3	赵有光	同济大学附属同济医院骨科	19	121	6.0	10.0
4	王丹	上海市第八人民医院妇产科	9	68	5.0	8.0