猪FcγRⅢ和γ链共转染Marc-145细胞系的建立

• 作者: 乔松林 史平玲 张改平 杜晓明 王林林 王爱萍 邬成业 郝慧芳
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪FcγRⅢ受体 γ链 共转染 Marc145细胞
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 6-10
• 分类号: Q78
• 字数: 3967字
• 语种: 中文

摘要

为了建立稳定表达猪FcγRⅢ (Porcine Fc gamma receptor Ⅲ,poFcγRⅢ )的Marc-145细胞系,从PAM细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅢ和γ链的cDNA,并构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1- FcγRⅢ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300 mg/L)和G418(400 mg/L)共筛选获得稳定表达猪FcγR Ⅲ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环试验和流式细胞术对细胞系进行了鉴定.结果表明,成功构建了猪FcγRⅢ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅢ的细胞系,表达于转染细胞表面的猪FcγRⅢ受体分子能与猪IgG特异结合.