小麦蛋白激酶TaNPK启动子的克隆及活性分析

• 作者: 刘沛 徐兆师 李连城 翟朝增 陈明 陈耀锋 马有志
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 启动子 染色体步移 原生质体 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2011,（19）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 3930-3936
• 分类号: S512.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.19.002

摘要

[目的]克隆小麦蛋白激酶基因TaNPK启动子,并分析5'非编码区对盐胁迫的响应,探索TaNPK的调控机制,为解析小麦抗盐机制提供理论依据.[方法]利用染色体步移技术从小麦中分离TaNPK读码框上游序列,构建启动子缺失突变体,在PEG4000介导下将重组质粒转入拟南芥叶片原生质体进行瞬时表达分析,以gus为报告基因研究不同调控序列的活性及盐诱导性分析.[结果]获得了TaNPK读码框上游2 004 bp的启动子序列,PEG介导的拟南芥原生质体瞬时表达分析表明,5'端缺失片段都在不同程度上驱动了GUS的表达；经过NaC(l)处理后的原生质体,GUS的表达量比不经处理的对照组明显提高,这与NaC1处理下TaNPK的实时荧光定量分析结果一致.[结论]经克隆获得了受盐胁迫诱导的小麦TaNPK启动子,启动子缺失区段在不同程度上驱动了gus的表达,-1 083-1 296 bp区段可能含有响应盐胁迫的负调控元件.