结核分枝杆菌H37Rv异柠檬酸裂解酶基因的克隆表达及活性

• 作者: 吴丛梅 殷玉和 牛雪 赵韫慧 高冷
• 来源期刊: 吉林大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分枝杆菌 异柠檬酸裂解酶 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 777-781
• 分类号: Q78
• 字数: 3545字
• 语种: 中文

摘要

以结核分枝杆菌H37Rv基因为模板,PCR反应扩增该菌株的异柠檬酸裂解酶基因(ICL),将其克隆入原核表达载体pET28b中,并将pET28b-ICL转化入大肠杆菌BL21( DE3)中进行诱导表达.结果表明,ICL蛋白的最佳诱导表达条件为:温度20℃,IPTG终浓度为0.25 mmol/L,诱导表达4h,在此条件下ICL实现了高效表达,以镍离子螯合型琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化ICL蛋白,纯化程度较高.酶学性质鉴定表明,实验获得了具有生物学活性的重组蛋白,重组ICL的比活力为24 μmol/( mg·min).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高冷	长春工业大学化学与生命科学学院	34	115	6.0	9.0
2	吴丛梅	长春工业大学化学与生命科学学院	26	61	5.0	5.0
3	殷玉和	长春工业大学化学与生命科学学院	21	31	3.0	3.0
4	赵韫慧	长春工业大学化学与生命科学学院	2	8	2.0	2.0
5	牛雪	长春工业大学化学与生命科学学院	1	3	1.0	1.0