高致病性PRRSV HuN4株Nsp4的原核表达及其抗体水平检测

• 作者: 刘永刚 刘鹤 徐明明 李丽琴 武嘉男 王刚 田志军 石文达 荣福龙 董建国 蔡雪辉
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: PRRSV Nsp4 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 219-222
• 分类号: S852.65
• 字数: 2686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.03.13

摘要

为进一步研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)Nsp4的免疫学特性,本研究根据PRRSV HuN4株序列,设计并合成用于扩增PRRSV HuN4株Nsp4基因的引物.将扩增产物与原核表达载体pGEX-6P-1连接,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中.Western blot试验显示,Nsp4在大肠杆菌中获得较高水平的表达,并且具有良好的反应活性.利用该蛋白建立ELISA方法,检测PRRSV HuN4株感染仔猪的不同时间内的血清,并比较抗Nsp4,囊膜蛋白和M蛋白,N蛋白的抗体水平,结果表明Nsp4抗体升高的时间晚于囊膜蛋白和M蛋白、N蛋白出现的时间,同时抗体水平也低于其他蛋白.