结核分枝杆菌RpfA蛋白的表达、纯化与鉴定

• 作者: 师长宏 张彩勤 毛峰峰 江鹰 白冰 赵勇 赵善民 郭晓雅
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 RpfA 表达 鉴定 纯化
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 104-107
• 分类号: R378
• 字数: 3187字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.02.006

摘要

目的 构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)RpfA的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达、纯化和鉴定.方法 用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出编码RpfA蛋白的Rv0867c基因,通过克隆载体pMD18-T构建质粒载体pMD18-T-Rv0867c.经酶切和DNA序列测定证实正确后,将Rv0867e基因克隆到pET32a(+)载体并在大肠杆菌BL21中诱导表,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot鉴定后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化.结果 双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与文献报道一致.Western-blot结果显示,在相对分子量约102 kDa处有分别与Anti-His单抗、Rpf结构域单抗和TB病人血清特异性结合带.结论 成功表达、鉴定和纯化了RpfA蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵善民	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
2	江鹰	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
3	赵勇	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
4	毛峰峰	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
5	张彩勤	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
6	郭晓雅	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
7	白冰	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0
8	师长宏	第四军区大学实验动物中心	1	0	0.0	0.0