扩展青霉DNA提取及PCR检测条件的优化

• 作者: 何鸿举 刘晓娇 吕丽娟 樊明涛 焦凌霞
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 扩展青霉 基因组DNA 聚合酶链式反应(PCR) 优化
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 115-119
• 分类号: Q939.5
• 字数: 3913字
• 语种: 中文

摘要

研究扩展青霉DNA的提取及其聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测条件的优化.分别采用玻璃珠法、氯化苄法、玻璃珠+氯化苄法提取扩展青霉菌及对照菌株的基因组DNA,经紫外测定和电泳检测实验,分析提取DNA的质量浓度和纯度;同时,根据扩展青霉多聚半乳糖醛酸酶基因内一段保守序列设计合成一对288bp的扩增引物,并对PCR检测条件进行优化.结果表明:玻璃珠+氯化苄法提取到的DNA质量浓度和纯度较理想,扩展青霉DNA可获得良好的特异性扩增,PCR扩增的最适退火温度为53～59℃,最适引物浓度为0.04～0.06umol/L,最适模板质量浓度为2.40～5.28μg/mL,dNTPs浓度对PCR扩增影响不大.运用实验所得优化参数检测扩展青霉菌,整个过程仅需3～4h,和传统的培养检测法相比,该方法可有效提高检测效率,可进一步将该方法应用于实践.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊明涛	西北农林科技大学食品科学与工程学院	163	1536	21.0	27.0
2	刘晓娇	西北农林科技大学食品科学与工程学院	10	41	4.0	5.0
3	何鸿举	西北农林科技大学食品科学与工程学院	6	16	3.0	3.0
4	焦凌霞	河南科技学院食品学院	27	139	5.0	11.0
5	吕丽娟	西北农林科技大学食品科学与工程学院	5	14	3.0	3.0