假丝酵母SSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 孙晓红 张云峰 杨艳秋 横山耕治 王丽 贺丹
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: 假丝酵母 微卫星 聚合酶链反应 正交实验
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 66-68
• 分类号: R379
• 字数: 2898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2011.01.022

摘要

目的 建立假丝酵母SSR-PCR反应体系,确立最佳反应条件,为将该技术用于临床假丝酵母感染的快速鉴定奠定基础.方法 根据引物Tm值设立退火温度梯度,确定适宜的退火温度.利用正交实验,对影响SSR-PCR 反应体系的Taq DNA聚合酶、模板DNA、dNTP、引物等4种主要因素,进行优化.结果引物最适退火温度为51℃.假丝酵母最佳的SSR-PCR反应体系为:在25 μl的PCR反应体系中加入Taq DNA聚合酶1.0 U、模板DNA为25 ng、dNTP为0.15 mmol·L-1、引物为0.5 μmol·L-1.结论 采用正交实验优化的SSR-PCR反应体系,操作简便,电泳条带清晰,多态性好,重复性强,可为进一步建立临床假丝酵母感染的快速鉴定提供借鉴.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓红	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	49	442	11.0	20.0
3	杨艳秋		21	259	8.0	16.0
4	王丽	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	138	637	12.0	18.0
7	贺丹	吉林大学白求恩医学院病原生物学系	32	176	7.0	12.0
8	张云峰		41	371	9.0	18.0
9	横山耕治	日本千叶大学真菌医学研究中心	2	10	1.0	2.0