犬瘟热病毒重组囊膜糖蛋白(H/F)全长质粒的构建

• 作者: 冯娜 刘玉秀 夏咸柱 李天松 杨松涛 王磊 王铁成 高玉伟
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 囊膜糖蛋白 全长质粒 构建
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 40-43,47
• 分类号: S852.695.5
• 字数: 4601字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2011.06.017

摘要

目的开发新型疫苗和改良目前使用的犬瘟热病毒(CDV)疫苗.方法以犬瘟热弱毒株CDV/R-20/8为模板,用Pme I单酶切pBluescript-F和pBuescript-H质粒中获得完整CDV-F和CDV-H基因片段,定向克隆到pCI-c1-EGFP质粒中,构建pCI-c1-F和pCI-c1-H质粒,正反向鉴定正确后,用Sal I和Mlu I酶分别对pCI-c1-F、pCI-c1-H、pCI-CDV-EGFP质粒进行双酶切,分别回收目的片段cl-F、c1-H片段和载体片段pCI-CDV-,将cl-F和cl-H分别插入载体pCI-CDV-中,通过PCR和酶切的方法进行筛选、鉴定阳性克隆.结果成功构建重组双囊膜糖蛋白全长质粒,分别命名为pCI-CDV-F和pCI-CDV-H,为下一步重组犬瘟热病毒的拯救及免疫原性分析奠定基础.