广东眼镜蛇毒磷脂酶A2的分离纯化及其酶活性质

• 作者: 蒋琳兰 郝彩 韩丽萍
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 磷脂酶A2 眼镜蛇属 蛇毒 分离和提纯 酶活性
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 575-578
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 从广东舟山眼镜蛇毒中分离纯化磷脂酶A2(Phospholipase A2,PLA2)组分,并分析其理化性质、酶活性质以及影响其酶活力的因素.方法 采用化学沉淀、Sephadex G-50凝胶过滤及UND Sphere S阳离子交换层析法对PLA2进行分离纯化;采用BCA法测定其蛋白浓度,HPLC法测定其纯度,SDS-PAGE测定其相对分子质量,PLA2测定方法测定其活力;并考察反应温度、反应pH值及金属离子对酶活性的影响及其热稳定性.结果 从广东舟山眼镜蛇毒中分离的PLA2蛋白浓度为0.6mg/ml,回收率为9.5%,HPLC纯度为99%,相对分子质量为14 300,比活力为133 μmol/(mg·min);最适反应温度及pH值分别约为60℃C和8.5;Ca2+和Mg2+可增强酶活力,K+、Ni2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+、Co2+和Cr2+对酶活力均有抑制作用;该酶具有较高的热稳定性.结论 从广东舟山眼镜蛇毒中分离纯化出一种高纯度的PLA2,该酶具有较高的最适反应温度和热稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩丽萍	广州军区广州总医院药剂科	86	921	15.0	28.0
2	蒋琳兰	广州军区广州总医院药剂科	81	580	12.0	21.0
3	郝彩	广州军区广州总医院药剂科	1	2	1.0	1.0