NirB启动子调控下鼠沙门氏菌体内诱导型表达载体的构建

• 作者: 刘学 刘明远 唐艺芝 张凌怡 徐德启 李慧萍 杨秀丽 王光明 王学林 郭恒 高鹤
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: 沙门氏菌 体内诱导型启动子 疫苗 暴露前
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1041-1044
• 分类号: R378.2
• 字数: 2536字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2011.07.001

摘要

目的 构建遗传稳定性良好的沙门氏菌体内诱导型表达载体.方法 以克隆载体pGB2为基础,将沙门氏菌厌氧启动子PnirB和EGFP基因串联,并在其多克隆位点 MCS 下游引入 rrnbT1T2 转录终止序列,构建沙门氏菌低拷贝体内诱导型表达载体 pGnirB-EGFP-rrnb,电转化入鼠伤寒沙门氏菌phoP/phoQ株,对质粒的稳定性及蛋白表达情况进行检测.结果 含有低拷贝重组质粒的沙门氏菌在缺失抗生素选择压力下盲传100代后质粒稳定性高于95%,在厌氧静置72 h培养后激光共聚焦显微镜下可观察到明显绿色荧光.结论 高度稳定的沙门氏菌体内诱导型表达载体构建成功,为研制以鼠伤寒沙门氏菌为活载体的新型口服疫苗奠定了基础.