端粒酶shRNA慢病毒载体的构建及转染人类胚胎干细胞

• 作者: 卢光琇 周菂 曾思聪
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 人类胚胎干细胞 慢病毒载体 转染
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1401-1403
• 分类号: Q95-3|Q291|Q75
• 语种: 中文

摘要

目的:构建端粒酶shRNA慢病毒载体及建立端粒酶稳定干扰的人类胚胎干细胞系.方法:将端粒酶基因特异性shRNA靶序列与慢病毒载体PLK0.1-puro连接、转化、挑取阳性克隆进行PCR及测序鉴定;利用包装细胞293T获得重组的慢病毒,感染人类胚胎干细胞,分为干扰组ShTert、载体组vector和野生型组wt;ealtime-PCR检测端粒酶mRNA的表达.结果:经PCR和DNA测序鉴定,成功构建端粒酶特异性shRNA慢病毒载体,并感染人类胚胎干细胞;经检测shTert组端粒酶mRNA表达较vector和wt组明显降低,vector组和wt组之间无明显差异.结论:通过成功构建的端粒酶特异性shRNA慢病毒载体对人类胚胎干细胞的转染实现了对其端粒酶mRNA的调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢光琇	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	208	1251	18.0	24.0
2	周菂	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	4	7	2.0	2.0
3	曾思聪	中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心	4	6	2.0	2.0