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摘要:
目的 筛选并优化介导微小RNA(miRNA)-221阻遏物转染肝癌HepG2细胞的方法.方法 使用7种转染试剂介导miRNA-221阻遏物在24孔板转染肝癌HepG2细胞.实时定量RT-PCR检测HepG2细胞的miRNA-221,计算敲除miRNA率,继而进行不同试剂用量、不同miRNA阻遏物浓度、正反向转染的对比.结果 Lipofectamine 2000,siPORT Amine transfection 及 combiMAGnetofection在转染40 nmol/L miRNA阻遏物72 h后到均达到了超过50%的miRNA敲除率,其中combiMAGnetofection敲除率最高(55±8)%.转染条件优化后发现反向转染、2 μL combiMAGnetofection及200 nmol/L miRNA 阻遏物的组合miRNA-221沉默效率最高(89±4)%,其细胞存活率为(92±7)%,转染率超过85%.结论 介导miRNA-221阻遏物转染HepG2细胞的最佳试剂是combiMAGnetofection,优化转染条件为使用2 μL的 combiMAGnetofection反向转染200 nmol/L的miRNA阻遏物72 h.
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文献信息
篇名 MicroRNA磁性纳米微粒反向转染法提高HepG2转染效率的应用
来源期刊 重庆医学 学科 医学
关键词 微RNA 转染 肝肿瘤 微小RNA-221 实时定量RT-PCR
年,卷(期) 2011,(33) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 3386-3388,后插2
页数 分类号 R1
字数 3181字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-8348.2011.33.026
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 陈罡 广西医科大学第一附属医院病理科 174 613 11.0 15.0
2 罗殿中 广西医科大学第一附属医院病理科 132 673 12.0 18.0
6 党裔武 广西医科大学第一附属医院病理科 68 332 9.0 14.0
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研究主题发展历程
节点文献
微RNA
转染
肝肿瘤
微小RNA-221
实时定量RT-PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
重庆医学
半月刊
1671-8348
50-1097/R
大16开
重庆市渝北区宝环路420号
78-27
1972
chi
出版文献量(篇)
30732
总下载数(次)
32
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