逆转录病毒载体介导人胰岛素样生长因子-Ⅰ在软骨细胞中的表达

• 作者: 任琦 孙洋 宋之明 张绍昆
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人胰岛素样生长因子-Ⅰ 逆转录病毒载体 软骨细胞 基因转移
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1775-1778
• 分类号: Q291
• 字数: 5132字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2011.10.028

摘要

目的 探讨逆转录病毒载体介导人胰岛索样生长因子-Ⅰ(human insulin-like growth factor-I,hIGF-I)体外转染兔软骨细胞后软骨细胞hIGF-I的表达情况及其生物学行为变化.方法 将构建的含有目的 基因的逆转录病毒载体pLNc-IGF-GFP体外转染兔关节软骨细胞,经G418筛选阳性克隆,采用RT-PCR及免疫化学染色检测转染软骨细胞中hIGF-I的表达情况,并在荧光显微镜下观察标记基因GFP的表达情况.采用MTT法、流式细胞仪、免疫细胞化学染色、二甲基驱甲蓝法及ELISA法对转染hIGF-I后的软骨细胞的增殖能力及表型进行检测.结果 G418筛选后获得的软骨细胞阳性克隆,经RT-PCR和免疫细胞化学检测表明hIGF-1基因在mRNA和蛋白质水平得到稳定表达,荧光显微镜下观察转染的软骨细胞可激发出绿色荧光,证明转染成功.转染软骨细胞株的增殖能力、Ⅱ型胶原和蛋白多糖的分泌水平,在转染后6 w内均高于同时间点未转染的软骨细胞,差异具有显著性(P<0.05).结论 逆转录病毒载体能有效地将hIGF-I基因转染至兔软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃,能够在较长时间维持软骨细胞表型,为进一步研究软骨缺损的组织工程修复和基因治疗打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张绍昆	吉林大学第一医院骨科	47	190	7.0	10.0
2	孙洋	吉林大学白求恩医学院免疫学系	34	96	6.0	8.0
3	宋之明	吉林大学第一医院骨科	16	49	4.0	6.0
4	任琦	长春生物制品研究所疫苗六室	4	5	2.0	2.0