TMV、CMV双价抗性RNA沉默表达载体的构建

• 作者: 丁灿 徐照丽 陈瑜欣 高玉龙
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: RNA沉默载体 烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术-研究报告
• 页码范围: 317-321
• 分类号: S336
• 字数: 2938字
• 语种: 中文

摘要

本研究以在植物体内转录出RNA沉默的高效诱导因子双链RNA(dsRNA)为目标,根据已报道的TMV AMP和CMV ARep的核苷酸序列设计特异性引物,分别从质粒pBIN-TMV △AMP(i/r)、pBIN-CMV ARep(i/r)扩增MP基因、Rep基因,并在pGEM-T Easy载体上将2片段串联起来,再用PCR扩增串联好的正反向MP-Rep基因.正向MP-Rep基因用BamHI和Kpn I切下,将所得基因片段与用同样酶切开的舍内含子的pKAN-In相连,取名+pKAN;用同样的方法,将反向MP-Rep基因用Xba I切下,将所得基因片段与用同样酶切开的+pKAN相连,取名pKAN-In-MP-Rep,再用Not I将包括Intron和正反向MP-Rep基因在内的片段切下,将其定向插入同样酶切开的pART27上,获得重组质粒pART27-In-MP-Rep.获得的载体可以应用于植物转基因抗病毒育种工程中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁灿	云南农业大学农学院	32	87	5.0	6.0
2	高玉龙		19	123	8.0	10.0
3	徐照丽		53	548	14.0	21.0
4	陈瑜欣	云南农业大学农学院	1	5	1.0	1.0