大麦黄矮病毒运动蛋白基因克隆及原核表达

• 作者: 卢娇 曲宇杰 曹雪松 赵庆臻
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 运动蛋白 原核表达 融合蛋白 重组质粒 基因重组
• 年，卷（期）: 2011,（23）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 13947-13948
• 分类号: Q785
• 字数: 2312字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.23.019

摘要

[目的]构建大麦黄矮病毒运动蛋白(BYDV-MP)基因的原核表达载体,并在Ecoli-BL21中进行高效表达.[方法]根据GenBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的基因序列设计合成1对引物,应用RT-PCR技术从感染大麦黄矮病毒的叶片中扩增得到大麦黄矮病毒(BYDV)的运动蛋白(MP)基因,利用基因重组技术构建pGEX-.4T-1 -MP,将其转化至大肠杆菌表达菌株E.coli-BL21( DE3)中,用IPTG诱导重组质粒pGEX-4T-1 -MP在E.coli-BL21中进行表达.[结果]对重组质粒进行酶切分析及序列测定,鉴定正确后,与GeneBank中收录的大麦黄矮病毒PAV6株系的MP基因序列比对分析,同源性达100％.在IPTG诱导下,高效表达出相对分子质量约43 kD的蛋白,蛋白质电泳(SDS-PAGE)结果表明,表达的蛋白条带与预期的GST-MP融合蛋白相符.[结论]成功构建了pGEX-4T-1 -MP的原核表达载体,在E coli-Bl21中高效表达了MP,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹雪松	聊城大学生命科学学院	23	50	4.0	6.0
2	曲宇杰	聊城大学生命科学学院	4	8	1.0	2.0
3	赵庆臻	聊城大学生命科学学院	6	47	2.0	6.0
4	卢娇	聊城大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0