SRAP分子标记用于苦荞分析中的条件优化

• 作者: 夏楠 李艳琴 王安虎 王耀文 蔡光泽 韩瑞霞
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 苦荞 SRAP-PCR 交互正交设计 变性PAGE 非变性PAGE
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 44-48
• 分类号: Q811.9
• 字数: 3792字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.01.019

摘要

[目的] 研究SRAP分子标记用于苦荞分析中的条件优化.[方法]采用交互正交设计L27(313)对苦荞SRAP-PCR反应体系进行了5因素(Mg2+、dNTP、Taq酶、模板DNA和引物)3水平优化筛选,比较了非变性和变性PAGE检测方法,并进行了DYCZ-24F与DYCZ-20C 2种电泳操作系统的对比试验.[结果]4个单因素(Mg2+、dNTP、Taq酶和引物)和2个交互作用(Mg2+×dNTP、Mg2+×Taq酶)对苦荞SRAP-PCR有极显著影响;最佳反应体系为:20 μl总体积,Mg2+ 1.5 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,Taq酶1.5 U,模板DNA 40 ng,引物0.25 μmol/L,10×缓冲液 2 μl.运用该体系对7份苦荞材料进行扩增,扩增条带清晰、多态性高、重复性好.将扩增产物进行非变性与变性PAGE和2种电泳操作系统检测,结果显示非变性PAGE、DYCZ-24F操作系统更适合于SRAP的分析.[结论]为今后构建苦荞SRAP遗传图谱奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李艳琴	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	45	621	14.0	23.0
2	夏楠	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	2	12	2.0	2.0
3	王耀文	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	3	24	2.0	3.0
4	韩瑞霞	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	3	42	2.0	3.0