大肠埃希菌O157:H7的实时荧光PCR检测方法研究

• 作者: 孙彦峰 席桂绒 张丽萍 张克俭 武永平 薛彩娥 薛莉 高涛
• 来源期刊: 实用预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠埃希菌O157:H7 实时荧光PCR 检测方法
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 362-364
• 分类号: R378.2+1
• 字数: 3163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3110.2012.03.012

摘要

目的 建立一种敏感、特异、快速的大肠埃希菌O157:H7的检测方法,应用于突发公共卫生事件及食源性致病菌流行病学调查的检测. 方法 根据GenBank大肠埃希菌O157:H7rfbE基因序列,设计引物和TaqMan探针,对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立实时荧光PCR检测大肠埃希菌O157:H7的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行评价. 结果 大肠埃希菌O157:H7菌株的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性；该方法检测的灵敏度可达1×102 cfu/ml.模拟污染的猪肉、羊肉、鸡肉、生食蔬菜样品,均可检出1×104 cfu/ml的细菌.从细菌核酸提取至完成检测约需3h. 结论 建立的实时荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、快速等优点,可用于大肠埃希菌O157:H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武永平		21	57	5.0	6.0
2	张克俭		31	108	7.0	8.0
3	高涛		18	57	5.0	6.0
4	张丽萍		9	38	4.0	6.0
5	席桂绒		13	45	4.0	6.0
6	薛彩娥		6	30	3.0	5.0
7	孙彦峰		8	24	3.0	4.0