BMP7基因真核表达载体的构建及荷瘤小鼠制备

• 作者: 任萍萍 程津津 郭春雷
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 医学
• 关键词: BMP7 pEGFP-C1 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 18-21
• 分类号: R34
• 字数: 3284字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2012.01.005

摘要

目的 克隆BMP7基因及构建BMP7基因真核表达载体,稳定转染于H22细胞系,制备荷瘤小鼠.方法 应用RT-PCR技术从人胚肾细胞系293T细胞总RNA中成功扩增出1 293 bp包含BMP7基冈编码区的cDNA序列,在上下游加上BamHI及HindⅢ双酶切位点后形成带酶切位点的BMP7基因,然后连入含BaraH Ⅰ及HindⅢ双酶切位点的pEGFP-C1表达质粒上,构建BMP7基因的重组真核表达质粒pEGFP-C1- BMP7.脂质体介导方法转染细胞,RT-PCR、western-blot方法检测其mRNA及蛋白表达,皮下注射制备荷瘤小鼠.结果 扩增的cDNA经测序比较与基因文库完全一致；BamHⅠ及HindⅢ双酶切后,质粒形成约4.7 kb和约1.3 kb两条带,与理论计算值完全一致.注射转染BMP7基因后H22细胞小鼠瘤体明显增大.结论 成功克隆BMP7基因及构建BMP7基因的真核表达载体.BMP7基因高表达可能是细胞癌变的原因之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任萍萍	中国医科大学实验动物部	7	40	3.0	6.0
2	程津津	中国医科大学实验动物部	8	31	3.0	5.0
3	郭春雷	中国人民解放军第463医院神经内科	3	0	0.0	0.0