小鼠雄激素受体真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 卢苇 张巧霞 张振明 张晓燕 朱伟杰 桂耀庭
• 来源期刊: 生殖与避孕
• 学科: 医学
• 关键词: 稳定转染 雄激素受体(AR) 载体构建 TM4细胞系
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1-4
• 分类号: R714.8
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)基因的cDNA,构建AR真核表达载体,并在睾丸支持细胞TM4中进行表达和鉴定.方法:应用RT-PCR法从小鼠睾丸中扩增AR,将测序正确的PCR产物克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体中,再将载体以脂质体方式转染至TM4细胞系中,通过G418筛选稳定转染AR的TM4细胞株,以RT-PCR法和Western blotting法检测转染前后AR在TM4细胞系中的表达情况.结果:RT-PCR法和Western blotting法检测的结果显示,转染pcDNA3.1(-)/AR质粒的细胞中AR基因的表达水平显著高于转染pcDNA3.1(-)质粒的对照组.结论:成功构建了小鼠AR真核表达载体pcDNA3.1(-)/AR和稳定转染的TM4细胞系,为进一步研究AR在睾丸支持细胞中的作用及其分子机制建立了细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱伟杰	暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所	151	1003	16.0	21.0
2	桂耀庭	北京大学深圳医院男性生殖与遗传重点实验室	78	236	9.0	11.0
3	张振明	北京大学深圳医院男性生殖与遗传重点实验室	4	6	1.0	2.0
4	张晓燕	北京大学深圳医院男性生殖与遗传重点实验室	22	193	6.0	13.0
5	卢苇	北京大学深圳医院男性生殖与遗传重点实验室	4	38	3.0	4.0
9	张巧霞	北京大学深圳医院男性生殖与遗传重点实验室	2	1	1.0	1.0