一种采用阴离子交换柱快速纯化Taq DNA聚合酶的方法

• 作者: 余彦 叶长亮 李程勋 林文雄 许铁城 陈树清 黄力坤
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Taq DNA聚合酶 硫酸铵 阴离子交换柱
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 734-738
• 分类号: Q784
• 字数: 2978字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0384.2012.07.014

摘要

通过37℃恒温振荡培养含有Taq DNA聚合酶基因的E.coli菌株,并用IPTG诱导该基因表达获得TaqDNA聚合酶蛋白,利用40％硫酸铵沉淀该蛋白后溶解于storage buffer中.此法获得的Taq DNA聚合酶带负电荷,因此采用阴离子交换柱纯化蛋白.试验结果表明,此法与传统的透析方法相比能快速地去除生物小分子杂质,同时去除透析方法无法除去的杂蛋白；既能保证Taq DNA聚合酶的生物学活性,同时能缩短纯化时间、提高Taq DNA聚合酶的纯度.以土壤微生物DNA、水稻cDNA为模板进行PCR扩增并对扩增产物进行测序,结果显示纯化后的Taq DNA聚合酶具有较高的扩增效率和保真性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李程勋	福建农林大学生命科学学院农业生态研究所	3	33	2.0	3.0
2	余彦	福建农林大学生命科学学院农业生态研究所	3	13	2.0	3.0
3	陈树清	福建农林大学生命科学学院农业生态研究所	1	0	0.0	0.0
4	叶长亮	福建农林大学生命科学学院农业生态研究所	1	0	0.0	0.0
5	黄力坤	福建农林大学生命科学学院农业生态研究所	3	10	1.0	3.0
6	许铁城	福建农林大学生命科学学院农业生态研究所	2	1	1.0	1.0