Taq DNA聚合酶的热纯化制备

• 作者: 丁燕华 刘树涛 齐庆远
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: Taq DNA聚合酶 热纯化 pET-32A BL21(DE3)
• 年，卷（期）: 2011,（17）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 10153-10155
• 分类号: Q786
• 字数: 2910字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.17.020

摘要

[目的]提高Taq DNA聚合酶的制备效率.[方法]利用Ni柱亲和色谱纯化载有6xHis标记的Taq DNA聚合酶,并重组载体,利用Taq DNA聚合酶的耐热特性,对粗提液75℃处理1h,之后通过PCR试验验证制备酶液的活力.[结果]所获重组的pET-32A-Taq能够在BL21(DE3)宿主菌中高效表达并可通过热变性去除杂蛋白,获得了活力远高于购买的Taq DNA聚合酶的酶制剂.[结论]使用热纯化法制备的Taq DNA聚合酶工艺简单,成本较低,能满足常规大量PCR实验要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	齐庆远	浙江师范大学化学与生命科学学院	6	7	2.0	2.0
2	丁燕华	浙江师范大学化学与生命科学学院	2	3	1.0	1.0
3	刘树涛	浙江师范大学化学与生命科学学院	3	6	2.0	2.0