ATF-2基因RNA干扰表达载体的构建及鉴定

• 作者: 毛卫未 熊芃 胡志坚 韩峰
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ATF-2基因 RNA干扰 表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 985-987
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的:构建活化转录因子2( ATF-2)基因RNA干扰的真核表达载体,观察其对HepG2肝癌细胞株增殖及凋亡的影响.方法:根据ATF-2 mRNA序列,合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆人质粒载体PBA-siU6,DNA测序鉴定重组质粒PBA-siATF-2.脂质体介导质粒转染HepG2细胞.Western blot法检测ATF-2蛋白表达；MTT方法检测细胞增殖率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率.结果:ATF-2基因RNA干扰载体经测序分析证实插入64 bp序列正确无误；Western blot法显示干扰组细胞内ATF-2蛋白表达量明显降低；ATF-2基因的下调导致HepG2细胞增殖阻滞和凋亡发生.结论:成功构建了ATF-2基因RNAi真核表达载体,下调HepG2细胞ATF-2基因表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛卫未	九江学院临床医学院检验科	12	53	5.0	7.0
2	胡志坚	九江学院临床医学院检验科	49	99	5.0	8.0
3	韩峰	九江学院临床医学院检验科	16	34	4.0	5.0