过表达及RNA干扰糖尿病相关锚定重复序列蛋白基因腺病毒的制备及鉴定

• 作者: 左湘 汪亚君 马国达 黄靓
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 糖尿病相关锚定重复序列蛋白 RNA干扰 腺病毒 H9c2细胞
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 衰老研究
• 页码范围: 337-340
• 页数: 4页
• 分类号: R392.33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2016.04.002

摘要

目的 构建含糖尿病相关锚定重复序列蛋白(DARP)基因的重组腺病毒过表达及RNA干扰载体.方法 应用PCR技术扩增大鼠DARP基因序列,设计并合成shRNA序列,分别插入表达载体GV-314和GV-119,经基因测序鉴定.用重组DARP过表达和shRNA表达穿梭载体与辅助包装质粒pBHGloxAE 1共转染人胚肾细胞HEK293,进行病毒包装、出毒和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度.用重组腺病毒感染大鼠H9c2细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度,Western Blot检测DARP蛋白表达.结果 基因测序显示DARP过表达及shRNA载体序列与原设计序列完全相符,转染HEK293细胞包装成功.DARP过表达和shRNA腺病毒明显影响H9c2细胞中DARP蛋白表达水平.结论 成功构建了大鼠DARP过表达及特异性shRNA腺病毒表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪亚君	广东医科大学附属医院临床医学研究中心	4	8	2.0	2.0
2	黄靓	广东医科大学广东省衰老相关心脑疾病重点实验室	3	2	1.0	1.0
3	马国达	广东医科大学广东省衰老相关心脑疾病重点实验室	3	1	1.0	1.0
4	左湘	广东医科大学广东省衰老相关心脑疾病重点实验室	1	0	0.0	0.0