蛋白连接组织生长因子表达腺病毒的构建及其基因功能

• 作者: 宫宁 常永生 方福德 章华兵
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 蛋白连接组织生长因子 过表达 腺病毒 饥饿
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 649-653
• 分类号: Q591.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2011.06.013

摘要

目的 构建及鉴定蛋白连接组织生长因子(CTGF)基因过表达腺病毒,初步探究CTGF在糖脂代谢方面的功能.方法 克隆CTGF过表达质粒,定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV,PmeⅠ酶切线性化穿梭质粒转化改造的E.coliBJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感受态细菌产生重组腺病毒载体,用PacⅠ线性化重组质粒,回收转染293A细胞包装病毒颗粒,经过3轮扩增,感染肝原代细胞,观察感染效率及检测基因表达情况.通过对小鼠不同时间段的饥饿处理,提取肝脏RNA做RT-PCR,实时定量PCR检测CTGF基因在不同营养条件下的变化情况.结果 成功包装CTGF的腺病毒,感染效率达90％以上.CTGF在不同营养条件下表达情况不同,并且与糖脂代谢重要基因过氧化物酶体增值激活受体γ共激活因子1α表达情况一致.饥饿24h,CTGF上调(3.38±0.51)倍；饥饿48h,CTGF上调(5.26±1.25)倍(P＜0.05).结论 初步认定CTGF可能参与糖脂代谢.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方福德	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	67	275	8.0	15.0
2	宫宁	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
3	章华兵	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
4	常永生	中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室	11	29	4.0	5.0