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摘要:
目的:探讨肾小管上皮间充质转化(EMT)细胞模型中胚胎发育基因WT1和Pax2的重新表达及其规律,并研究上调表达外源性WT1对肾小管上皮细胞株(NRK52E)的影响.方法:采用10 ng/ml IL-1α刺激体外培养的NRK52E细胞,建立EMT细胞模型.采用脂质体转染技术,将pRc/CMV-D-WT1质粒瞬时转染NEK52E细胞.分别提取EMT细胞模型和质粒转染组不同时间点细胞的RNA和蛋白质,采用RT-PCR和Western blot检测NEK52E细胞WT1、Pax2、上皮细胞标志E-cadherin和间充质标志α-SMA的表达,研究基因表达的时效性变化规律,并观察细胞的形态.结果:成功建立EMT细胞模型,该模型中E-cadherin的表达显著减少,α-SMA的表达显著增多,细胞发生明显的成纤维化样改变.在EMT细胞模型中,出生后关闭的WT1和Pax2获得重新表达,且Pax2的表达早于α-SMA和WT1.在NEK52E细胞中上调表达WT1,细胞表达α-SMA,不表达Pax2,同时E-cadherin的表达显著减少,细胞出现成纤维化样改变.结论:Pax2和WT1基因是EMT中的关键基因,在EMT发生时呈序列启动,Pax2在EMT中处于WT1上游.胚胎发育基因WT1和Pax2的重新表达可能是EMT的重要机制.
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RNA干扰
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文献信息
篇名 肾小管上皮间充质转化细胞模型中WT1和Pax2重新表达的研究
来源期刊 中国中西医结合肾病杂志 学科 医学
关键词 基因表达 上皮间充质转化 肾小管上皮细胞
年,卷(期) 2012,(2) 所属期刊栏目 实验论著
研究方向 页码范围 107-111
页数 分类号 R692
字数 4030字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-587X.2012.02.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 黄彬 中山大学附属第一医院检验医学部 70 408 10.0 16.0
2 姜傥 中山大学附属第一医院检验医学部 64 276 8.0 13.0
3 皮蕾 广东省广州市妇女儿童医学疗中心检验科 3 12 1.0 3.0
4 滕军旗 中山大学附属第一医院检验医学部 4 13 2.0 3.0
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研究主题发展历程
节点文献
基因表达
上皮间充质转化
肾小管上皮细胞
研究起点
研究来源
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研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国中西医结合肾病杂志
月刊
1009-587X
14-1277/R
大16开
山西太原市06079信箱
22-26
2000
chi
出版文献量(篇)
8512
总下载数(次)
7
总被引数(次)
61997
相关基金
广东省自然科学基金
英文译名:Guangdong Natural Science Foundation
官方网址:http://gdsf.gdstc.gov.cn/
项目类型:研究团队
学科类型:
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