鸭CD8α基因启动子的分析及其转录活性

• 作者: 张扬 徐琪 李秀 段修军 赵荣雪 陈国宏 陈昌义 陈阳 黄正洋
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭 CD8α基因 启动子 转录活性
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 2468-2473
• 分类号: S834|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.12.016

摘要

[目的]对鸭CD8α基因启动子活性区域进行分析,为鸭CD8α基因功能和表达调控机理研究提供依据.[方法]利用前期基因组步移技术获得的鸭CD8α基因的启动子区序列,制备一系列启动子缺失突变体(-625/-1 bp,-1 110/-1 bp,-1 413/-1 bp,-2 151/-1 bp),定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建荧光素酶报告基因重组载体,采用Lipofectamine 2000将重组质粒瞬时转染DT40细胞,分析CD8α基因启动子系列缺失突变体在细胞内的转录活性.[结果]鸭CD8α基因5'侧翼区长片段具有较强的启动子活性,-1110--625启动子活性最强,且-625--1和-625--1 110 bp区域均存在正调控元件.[结论]成功构建了荧光素酶报告基因真核表达载体,确定了鸭CD8α基因调控区,为进一步研究其转录调控机制奠定了基础.