Mucin16蛋白的表达纯化及单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 丁宇婷 于占娇 李晓彤 杨赟 龚慧婷
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: mucin 16 CA125 蛋白纯化 单克隆抗体 杂交瘤
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 960-963,971
• 分类号: R392.11|Q813.2
• 语种: 中文

摘要

目的:在原核生物中表达带有His标签的mucin 16N端重组蛋白(简称为His-mucin 16N),制备抗mucin 16的单克隆抗体(mAb).方法:将mucin 16基因片段插入原核表达载体pET-32,在大肠杆菌中表达重组蛋白,用亲和纯化方法纯化后免疫BALB/c小鼠,并进行细胞融合.筛选可稳定分泌抗mucin 16抗体的阳性单克隆杂交瘤细胞株,用Western blot、ELISA、免疫荧光和免疫组化等方法分析和鉴定抗mucin 16的mAb.结果:表达并纯化了His-mucin 16N蛋白；筛选出几株可稳定分泌特异性抗人mucin 16 mAb的细胞株；挑选出效价高、特异性好的1株进行纯化.获得的抗mucin 16 mAb,可用于Western blot、ELISA、免疫组化、免疫荧光等检测,并鉴定该抗体亚型为IgG1.通过上述免疫学实验,分析了在不同肿瘤细胞中mucin 16的表达情况.结论:在原核生物中成功表达和纯化带His标签的mucin 16N重组蛋白,制备出具有高特异性的抗mucin16的mAb.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓彤	厦门大学生命科学学院杂交瘤和抗体技术中心	6	5	2.0	2.0
2	丁宇婷	厦门大学生命科学学院杂交瘤和抗体技术中心	2	2	1.0	1.0
3	杨赟	厦门大学生命科学学院杂交瘤和抗体技术中心	2	4	2.0	2.0
4	龚慧婷	厦门大学生命科学学院杂交瘤和抗体技术中心	2	4	2.0	2.0
5	于占娇	厦门大学生命科学学院杂交瘤和抗体技术中心	2	4	2.0	2.0