八肋游仆虫eRF1a的C端是肽链释放因子eRF3的结合区

• 作者: 宋莉 柴宝峰 梁爱华
• 来源期刊: 山西大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 八肋游仆虫 肽链释放因子1a 表达 Pull-down分析
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学与环境科学
• 页码范围: 369-375
• 分类号: Q78
• 字数: 1705字
• 语种: 中文

摘要

真核生物蛋白质合成终止需要两类肽链释放因子,eRF1和eRF3.研究表明八肋游仆虫的两类肽链释放因子在体内和体外都能形成复合物,且第一类肽链释放因子eRF1a与第二类肽链释放因子eRF3的C端结合.为了确定eRF3在eRF1a上的结合区,本研究以八肋游仆虫第一类肽链释放因子eRF1a基因为模板,用PCR的方法获得了N端分别截短140和206个氨基酸的eRF1a片段,同时在这两个片段的3'端融合了编码6个组氨酸残基的核苷酸序列,将这两个序列分别插入原核表达载体pTWIN1,并构建重组表达质粒pTWIN1-eRF1aC1 his6和pTWIN1-eRF1 aC2his6,转入大肠杆菌BL21( DE3)中获得了可溶性表达,通过一步His60 Ni Superflow柱亲和层析,重组蛋白CBD-intein-eRF1 aC1 his6和CBD-intein-eRF1aC2 his6获得纯化.体外pull down分析显示eRF1aC1和eRF1aC2均能与八肋游仆虫第二类释放因子eRF3相互作用,这表明八肋游仆虫eRF1a的C端是肽链释放因子eRF3的结合区.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋莉	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	17	38	3.0	5.0
2	梁爱华	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	97	555	13.0	18.0
3	柴宝峰	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	72	1241	15.0	34.0