八肋游仆虫蛋白激酶A的克隆及原核表达分析

• 作者: 佘梅 张志云 梁爱华 王软林
• 来源期刊: 山西大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 八肋游仆虫 蛋白激酶PKAc 基因克隆 表达纯化
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学与环境科学
• 页码范围: 701-706
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13451/j.cnki.shanxi.univ(nat.sci.).2015.04.025

摘要

为了研究低等真核生物中蛋白激酶PKA(cAMP-dependent protein kinase A)的生物学功能,以八肋游仆虫(Eu plotes octocarinatus)为实验材料,通过生物信息学方法分析八肋游仆虫基因组及转录组数据,发现八肋游仆虫中编码蛋白激酶PKAc(PKA催化亚基)的基因只有一种.通过PCR扩增获得游仆虫PKAc基因(EoPKAc),分析表明EoPKAc基因全长1158 bp,不含有内含子,开放阅读框981 bp,编码326个氨基酸.序列比对结果显示EoP-KAc含有与其它已知蛋白激酶相同的11个亚结构域(subdomain)以及一些重要的保守氨基酸.构建原核表达质粒pGEX-6P-1-PKAc,转化至大肠杆菌BL21中,EoPKAc获得高效表达,经GST柱亲和层析后获得较高纯度的EoPKAc蛋白,表达产物经Western blotting检测为阳性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁爱华	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	97	555	13.0	18.0
2	张志云	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	21	72	5.0	8.0
3	王软林	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	13	2	1.0	1.0
4	佘梅	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	3	1	1.0	1.0