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摘要:
目的 在大肠杆菌中表达登革Ⅱ型病毒包膜糖蛋白(E)的第一,二结构域(DⅠ/Ⅱ)并进行免疫反应性鉴定.方法 登革II型病毒接种乳鼠,提取总RNA,经RT-PCR扩增目的 基因片段.双酶切PCR纯化产物和质粒pET-28a(+)并连接构建重组质粒pET28a- DV2-E-D1&2.筛选阳性菌落,提取质粒并转化感受态细胞,IPTG诱导表达目的 蛋白并进行SDS-PAGE分析,Western blot 鉴定.结果 RT-PCR扩增得到约900 bp的目的 基因片段,双酶切及测序分析表明,插入序列正确且开放读码框正确.重组菌诱导后在37 kD位置有明显的诱导后表达带,其大小与预测值一致.经12%SDS-PAGE分析,显示重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中;Western blot结果 显示重组蛋白与His·Tag单抗和登革病毒单抗(D1-11)均发生反应.结论 成功地在大肠杆菌中表达登革II型病毒包膜糖蛋白(E)的DⅠ/Ⅱ,免疫反应性鉴定结果 表明其具有良好的免疫反应性.
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B区
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大肠杆菌
内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 登革Ⅱ型病毒E蛋白Ⅰ、Ⅱ结构域在大肠杆菌中的表达及免疫反应性鉴定
来源期刊 中国人兽共患病学报 学科 医学
关键词 登革病毒 E蛋白 第I-II结构域 表达 免疫印迹
年,卷(期) 2012,(5) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 425-428
页数 分类号 R373.3
字数 3184字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2012.05.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 郑学礼 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系 50 159 7.0 9.0
2 付宇姣 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系 3 6 2.0 2.0
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登革病毒
E蛋白
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免疫印迹
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中国人兽共患病学报
月刊
1002-2694
35-1284/R
大16开
福建省福州市津泰路76号
34-46
1985
chi
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