啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测

• 作者: 张祥林 李世访 段维军 邓丛良 郭立新 闻伟刚
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 啤酒花潜隐类病毒 实时荧光RT-PCR 检测 TaqMan-MGB探针
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 466-473
• 页数: 8页
• 分类号: S432.41
• 字数: 3298字
• 语种: 中文

摘要

根据啤酒花潜隐类病毒(HpLVd)各分离物基因序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对HpLVd的实时荧光RT-PCR检测方法.通过对反应体系的优化,确定了HpLVd的实时荧光RT-PCR最佳反应条件:Mg2+终浓度为5.5 mmol/L,引物终浓度为0.7μmol/L,探针终浓度为0.5μmol/L.灵敏度对比试验结果显示,实时荧光RT-PCR的灵敏度较普通RT-PCR通过琼脂糖凝胶电泳高10倍,在25 μL反应体系中,总RNA含量达到20 pg就能通过实时荧光RT-PCR检测出来.此方法也能成功检测田间样品上的啤酒花潜隐类病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李世访	中国农业科学院植物保护研究所	50	364	11.0	16.0
2	闻伟刚		36	406	11.0	18.0
3	郭立新		14	69	5.0	7.0
4	张祥林		65	571	13.0	21.0
5	段维军		25	135	6.0	10.0
6	邓丛良		35	176	8.0	11.0