蛋白质内含子介导的蛋白纯化系统在变性条件下的应用

• 作者: 孟清 施长华 林瑛 汤传龙
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白质内含子 断裂 变性条件 条件优化
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 68-71
• 页数: 4页
• 分类号: Q81
• 字数: 2525字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2012.05.068

摘要

由蛋白质内含子介导的亲和蛋白质纯化系统(IMPACT)已得到广泛应用,通过其纯化得到的目的蛋白不含蛋白纯化标签以及多余的氨基酸残基,且操作简单成本低廉.这些优点使得其相对于其他蛋白纯化系统有着无与伦比的优势.但是现有报道都局限于非变性条件下使用,这往往会限制其在一些包涵体蛋白变性条件下使用.以一已知表达形成包涵体形式的丝素蛋白为例,研究IMPACT系统在时变性条件下使用变性剂浓度、温度和诱导断裂还原剂浓度.实验表明,在4M尿素,100 mM DTT室温作用下蛋白质内含子会获得最大断裂效率(80％).柱上在线断裂实验表明,其最终蛋白得率超过65％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟清	东华大学生物科学与技术研究所	43	52	5.0	6.0
2	林瑛	东华大学生物科学与技术研究所	16	5	1.0	1.0
3	施长华	东华大学生物科学与技术研究所	3	4	1.0	2.0
4	汤传龙	东华大学生物科学与技术研究所	1	0	0.0	0.0