乳酸乳球菌同源整合载体的构建及鉴定

• 作者: 任大勇 李昌 沈明浩 秦艳青 金宁一
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乳酸乳球菌 usp基因 同源重组 表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 628-633
• 分类号: S852.61|Q782
• 语种: 中文

摘要

构建乳酸乳球菌同源整合载体,实现外源基因在乳酸菌中的同源重组和转入.PCR扩增红霉素抗性基因,连接到T载体中,构建载体pMDE;根据乳酸乳球菌Lactococcus lactis 1.2472全基因组中usp基因序列设计引物,PCR扩增usp基因两端的同源重组臂LB和RB基因序列,PCR产物经回收后,克隆至pMDE载体中,获得同源重组载体pMDELR,电转化至Lactococcus lactis 1.2472感受态细胞中,挑选阳性克隆,采用PCR和SDS-PAGE方法进行鉴定.结果表明:成功扩增同源重组臂LB和RB,红霉素抗性基因替换了乳球菌中的usp基因,整合到了乳球菌基因组中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金宁一	军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室	87	502	10.0	18.0
2	沈明浩	吉林农业大学食品科学与工程学院	99	322	10.0	14.0
3	李昌	军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室	17	155	5.0	12.0
4	任大勇	吉林农业大学食品科学与工程学院	47	206	6.0	13.0
6	秦艳青	吉林农业大学食品科学与工程学院	7	110	3.0	7.0