LMO3逆转录病毒表达载体的构建及其对SK-N-AS细胞增殖的影响

• 作者: 张长菊 惠玲 王剑锋 王晓辉 王美亮 贾庆华
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: LMO3 载体构建 逆转录病毒载体 pLXSN
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 166-170
• 分类号: Q78
• 字数: 4043字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.03.003

摘要

目的 构建包含LMO3 ( LIM-only 3,LMO3)全长基因的逆转录病毒表达载体,感染人神经母细胞瘤SK-N-AS,检测LMO3对SK-N-AS细胞增殖的影响.方法 将质粒pEGFP-C1-LMO3经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建重组逆转录病毒表达载体pLXSN-LMO3,导入包装细胞pA317,获得逆转录病毒颗粒,感染SK-N-AS细胞,用RT-PCR及Western 印迹鉴定,检测LMO3感染后细胞的增殖及细胞周期分布情况.结果 获得了能正确表达LMO3基因的重组逆转录病毒表达载体pLXSN-LMO3;LMO3基因被逆转录病毒成功导入SK-N-AS细胞后,与对照组细胞相比,LMO3感染组G0/G1期细胞减少,S期细胞增加,感染48 h后,LMO3感染组细胞的增殖能力显著高于空载体对照组及SK-N-AS组(P＜0.05).结论 成功构建了LMO3基因的逆转录病毒表达载体,LMO3可以通过促进SK-N-AS细胞由G0/G1期进入S期,从而促进细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王剑锋	兰州军区兰州总医院医学实验中心甘肃省干细胞与基因药物重点实验室	19	29	3.0	3.0
2	惠玲	兰州军区兰州总医院医学实验中心甘肃省干细胞与基因药物重点实验室	37	96	5.0	7.0
3	王晓辉	兰州军区兰州总医院医学实验中心甘肃省干细胞与基因药物重点实验室	13	35	3.0	5.0
4	张长菊	兰州大学第二医院检验中心	4	10	2.0	3.0
5	王美亮	兰州军区兰州总医院医学实验中心甘肃省干细胞与基因药物重点实验室	5	10	2.0	3.0
6	贾庆华	兰州军区兰州总医院医学实验中心	15	19	2.0	3.0