兔抗猪CD163蛋白多克隆抗体制备及鉴定

• 作者: 冷超良 吴江 安同庆 宫大庆 张德礼 彭金美 杨永倩 田志军 郭娟 陈家锃
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: CD163 抗体 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1624-1628
• 分类号: S852
• 语种: 中文

摘要

为制备兔抗猪CD163多克隆抗体，采用RT-PCR方法从猪PAMRNA中扩增CD163胞质外区部分基因SRCR4-5，克隆至pGEX-6p-1原核表达载体，在IPTG诱导下获得约50000以包涵体形式表达的重组蛋白。WesternBlotting分析表明，表达产物能够被GST单抗所识别。用该重组蛋白免疫兔制备多抗血清，经间接ELISA检测，多抗血清效价可达10^5，流式检测发现可与Marc-145和PAM上的天然CD163分子相互作用。抗体阻断试验证明制备的多抗血清可以部分阻断PRRSV感染。本试验为进一步研究PRRSV与受体一CDl63相互作用机制打下了基础。