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摘要:
hSSB1(Human Single-strand DNA-binding protein)是参与细胞DNA损伤应答的一个重要信号分子.根据GenBank提供的hSSB1基因序列扩增其cDNA序列,插入到pBABE逆转录病毒载体中,连接后的质粒转化后经过双酶切,PCR扩增及测序来鉴定pBABE-hSSB1阳性克隆.将阳性表达的pBABE-hSSB1和包装质粒转染到HEK293T细胞中,产生病毒液.将包装好的病毒感染细胞并用嘌呤霉素(puromycin)筛选稳定表达hSSB1的细胞株.重组pBABE-hSSB1质粒经双酶切,PCR扩增鉴定及DNA测序分析等方法证实克隆成功.Western blotting 检测发现转染重组质粒pBABE-hSSB1的细胞株中hSSB1蛋白的表达水平高于对照组.该研究成功构建了针对hSSB1基因的逆转录病毒载体(pBABE-hSSB1),并得到了稳定高表达hSSB1的细胞株,为深入研究其功能奠定了基础.
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文献信息
篇名 新基因hSSB1逆转录病毒载体的构建、鉴定和稳定株的筛选
来源期刊 中山大学学报(自然科学版) 学科 医学
关键词 hSSB1 病毒载体 稳定株
年,卷(期) 2012,(2) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 73-76,85
页数 分类号 R73-3
字数 3272字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张如华 4 22 2.0 4.0
3 徐双兵 2 5 2.0 2.0
5 康铁邦 2 5 2.0 2.0
11 武远众 1 2 1.0 1.0
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hSSB1
病毒载体
稳定株
研究起点
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研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
中山大学学报(自然科学版)
双月刊
0529-6579
44-1241/N
大16开
广东省广州市新港西路135号
46-15
1955
chi
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5017
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45576
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