重组变异链球菌表面蛋白的可溶性表达及抗体制备

• 作者: 李宇红 樊明文 金洁
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 变异链球菌表面蛋白 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 251-254,258
• 分类号: R781
• 字数: 4088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.03.007

摘要

目的 探讨重组变异链球菌表面蛋白(rPAc)在大肠杆菌中可溶性表达的最佳诱导条件并制备其多克隆抗体.方法 通过改变pET20b (+)-AP/BL21 (DE3) plysS工程菌的培养条件,提高rPAc可溶性表达水平.用纯化的rPAc免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)和Western blot法鉴定抗体的免疫学活性.结果 pET20b(+)-AP/BL21 (DE3) plysS工程菌在Luria-Bertani (LB)培养基(pH值为7.2)上培养,至表示菌体密度的光密度值OD600nm=0.6时加入1.0 mmol·L-1异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),30℃诱导培养4h,rPAc的可溶性表达量最高.以纯化的rPAc免疫BALB/c小鼠,制备抗rPAc多克隆抗体,ELISA法测定抗体效价为1:6000,Western blot法鉴定出该抗体可特异性识别rPAc.结论 rPAc高效可溶性表达和抗rPAc多克隆抗体的制备为DNA初次免疫—蛋白质加强免疫策略的深入研究奠定了必要的物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊明文		232	2339	23.0	36.0
2	金洁	杭州口腔医院牙体牙髓病科	2	10	2.0	2.0
6	李宇红		27	135	6.0	10.0