转植酸酶基因(phyA2)玉米定性、定量PCR检测

• 作者: 于彩虹 孙红炜 李凡 杨淑珂 田少亭 路兴波
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转植酸酶基因玉米 定性PCR 定量PCR zSSIIb 植酸酶基因(phyA2)
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 356-361
• 分类号: S858.28
• 字数: 4037字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.04.003

摘要

转植酸酶基因玉米检测是对转植酸酶基因玉米释放进行有效监管的重要前提和技术支撑.本研究根据转植酸酶基因玉米(Zea mays)外源植酸酶基因phyA2序列设计基因特异性引物,进行了定性、定量PCR检测.定性结果显示,该引物可有效检测植酸酶玉米中phyA2基因,而在其他不含植酸酶基因的材料中则检测不到相应基因,表明该引物具有很高的特异性.以玉米内标准基因玉米淀粉合酶异构体zSTSII-2基因(zSSIIb)和植酸酶基因phyA2为对象,进行SYBR Green Ⅰ染料法荧光定量PCR反应,绘制2种基因扩增循环数-拷贝数标准曲线图,根据混合样品中(zSSIIb)和植酸酶基因phyA2的拷贝数计算样品中的转基因含量,并做熔解曲线分析.结果表明,zSSIIb和phyA2标准曲线相关系数分别为0.998和0.995,相关性较好,两个基因的熔解曲线均呈单峰型,表明引物特异性较强,混合玉米样品(植酸酶玉米含量分别为1％、0.5％和0.1％)中植酸酶玉米含量分别为1.1％、0.54％和0.17％,实测值与理论值接近.本研究建立了转植酸酶基因玉米定性、定量PCR检测体系,可有效地对转植酸酶基因玉米进行检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路兴波	山东省农业科学院植物保护研究所	44	540	14.0	20.0
2	孙红炜	山东省农业科学院植物保护研究所	34	480	12.0	20.0
3	李凡	山东省农业科学院植物保护研究所	15	171	8.0	13.0
4	杨淑珂	山东省农业科学院植物保护研究所	9	32	4.0	5.0