苯丙氨酸生物合成途径关键基因的串联表达

• 作者: 徐琪寿 芦佳 赵越 郭军 黄坤央 黄英武
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 苯丙氨酸 大肠杆菌 串联表达 甘油
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 488-492
• 分类号: Q78
• 字数: 3895字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.04.005

摘要

目的:改造大肠杆菌苯丙氨酸生物合成的中心代谢途径,优化关键酶基因pheA、aroF、ppsA、tktA的协同表达,进一步提高苯丙氨酸产量.方法:构建重组质粒pZE12-AFPT,鉴定后通过SDS-PAGE观察其蛋白表达量,并转入缺陷菌大肠杆菌MG△中构建工程菌,发酵培养后测量苯丙氨酸产量,与本室保存的重组质粒MG△pZE12-AF做对比；构建重组质粒pZE21-AF和pZA31-PT,将后者转入感受态pZE12-AF和pZE21-AF中,得到双抗性质粒,并比较转化前后苯丙氨酸的产量.结果:工程菌MG△pZE12-AFPT的苯丙氧酸产量比对照菌株MG△pZE12-AF提高了近1.6倍,并且实现了4个串联基因的协同表达；质粒pZA31-PT转入pZE12-AF和pZE21-AF后,苯丙氨酸产量比原质粒pZE12-AF和pZE21-AF分别提高了近0.6倍和2.8倍.结论:实现了4个关键酶基因的串联表达,改造了苯丙氨酸的生物合成途径,使得苯丙氨酸产量有所提高,为进一步得到其高产菌株奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭军	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	65	445	12.0	17.0
2	黄坤央	郑州大学药学院	3	6	2.0	2.0
3	芦佳	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	3	6	2.0	2.0
4	赵越	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	7	6	2.0	2.0
5	徐琪寿	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	61	580	13.0	22.0
6	黄英武	解放军306医院中心实验室	6	41	3.0	6.0