我国汉族人群FⅧ基因14号外显子poly A区缺失或插入A热点突变分析

• 作者: 丁秋兰 奚晓东 张利伟 戴菁 梁茜 王学锋 王鸿利 许冠群 陆晔玲
• 来源期刊: 诊断学理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 血友病A FⅧ基因 14号外显子 移码突变
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 466-470
• 页数: 5页
• 分类号: R566.6+1
• 字数: 3828字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2870.2012.05.008

摘要

目的:对FⅧ基因14号外显子poly A区缺失或插入A进行热点突变分析.方法:采用活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间、纤维蛋白原、凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)及血管性血友病因子抗原及活性(vWF:Ag、vWF:Act)等测定进行血友病A表型诊断,用长链聚合酶链反应和双重PCR进行FⅧ基因内含子22倒位及内含子1倒位检测,采用直接核苷酸测序法检测FⅧ基因启动子区、各外显子及其侧翼序列中的突变.用AccuCopyTM多重基因拷贝数检测试剂盒对未找到突变的患者进行拷贝数检测,采用多重PCR扩增FⅧ基因内外6个短串联重复序列(FⅧUp226、FⅧUp146、FⅧInt13、FⅧInt25、FⅧDown48、DXS1073)进行遗传连锁分析.结果:在近4年检测的343个血友病A家系中,发生于FⅧ基因14号外显子poly A区的插入或缺失A突变共32例,占总血友病A家系的9.33％,占小片段插入或缺失突变的42.11％.这些家系中多数为散发(21例),无血友病家族史,其中10例先证者的FⅧ基因突变为de novo突变.且部分患者表现为轻型或中型血友病(FⅧ:C 2％～10％).结论:FⅧ基因14号外显子A8/A9区的插入或缺失A为血友病A的突变热点,其致病机制可能与该区域的特殊结构导致的DNA聚合酶在DNA复制过程中的滑移、错配相关,而poly A区DNA复制、转录、蛋白翻译过程的二次错误又可能使患者的表型得到部分“纠正”.