ATP依赖的人Lon蛋白酶的表达、纯化及其活性鉴定

• 作者: 刘永章 吕斌 夏雷 姚蔚 王璐 黎真
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 线粒体 Lon蛋白酶 蛋白纯化 蛋白酶活性
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 899-905
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

ATP依赖的人Lon蛋白酶是一种同质寡聚、环状的蛋白酶,主要位于细胞线粒体基质中.许多研究表明,Lon蛋白酶对于维护细胞的内环境稳定起着重要作用,并参与线粒体蛋白质量控制和代谢调控.将pPROEXl His6-Lon重组质粒在Escherichia coli Rosetta 2菌株中诱导表达用Ni2+柱亲和层析法纯化,获得纯度较高的目的蛋白.经纯化后,Lon蛋白酶的比酶活达到0.17 U/mg.通过多肽底物Rhodamine 110、bis-(CBZ-L-alanyl-L-alanine amide)[(Z-AA)2 Rh 110]的降解检测显示,Lon蛋白酶具有肽酶活性,并被ATP所刺激.Casein和线粒体转录因子A降解实验表明,纯化的Lon蛋白酶具有蛋白水解活性,而且蛋白水解活性依赖于ATP.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黎真		6	22	2.0	4.0
2	姚蔚		16	37	4.0	5.0
3	刘永章		28	62	4.0	5.0
4	吕斌		6	8	1.0	2.0
5	夏雷		2	0	0.0	0.0
6	王璐		1	0	0.0	0.0