Fibulin-5基因慢病毒表达载体的构建与鉴定

• 作者: 余淦 叶章群 徐华 李恒 杨洋 肖巍
• 来源期刊: 现代泌尿生殖肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Fibulin-5 慢病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 85-89
• 分类号: R318.16
• 字数: 3495字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1674-4624.2012.02.007

摘要

目的 构建Fibulin-5基因的慢病毒表达载体.方法 从pBluescript-Fibulin5质粒中克隆出Fibulin-5基因,将其连同慢病毒载体质粒pCDH-CMV-MCS-EF1双酶切,使目的 基因连接到载体质粒中,构建成重组慢病毒载体质粒pCDH-F5.对重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行酶切鉴定和测序鉴定后,制备包装病毒并感染膀胱癌细胞系5637,检测细胞中Fibulin-5基因的表达水平.结果 构建的重组慢病毒载体质粒pCDH-F5进行PCR及酶切鉴定,获得的克隆和酶切产物与预计的基因片段大小一致.所获得的Fibulin-5基因经测序后与报道序列对比仅有1处突变,且属同义突变,说明pCDH-F5中携带正确的Fibulin-5基因.通过感染5637细胞,发现构建的慢病毒转染效率达95%以上,且能有效表达Fibulin-5基因.结论 实验成功构建了Fibulin-5基因的慢病毒表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李恒	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	59	572	12.0	22.0
2	叶章群	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	497	4467	31.0	47.0
3	杨洋	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	35	86	6.0	8.0
4	余淦	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	7	20	3.0	4.0
5	肖巍	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	11	15	3.0	3.0
6	徐华	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	21	46	4.0	5.0