蛇足石杉HsCAS1基因克隆及序列分析

• 作者: 何顺志 宋经元 张鑫 殷秀梅 牛云云 罗红梅 陈士林
• 来源期刊: 世界科学技术-中医药现代化
• 学科: 农学
• 关键词: 环阿屯醇合成酶 蛇足石杉 甾醇 次生代谢
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 专题讨论之一:中药资源可持续利用的技术研究
• 页码范围: 1159-1165
• 分类号: S567.239
• 字数: 4565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-3849.2012.01.004

摘要

本研究对蛇足石杉(Huperzia serrata)环阿屯醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)基因HsCAS1编码区进行克隆及序列分析.根据本实验室已获得的蛇足石杉转录组数据,从中获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的编码CAS的转录本,采用RT-PCR方法获得该基因的编码区序列,并对HsCAS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析.利用实时荧光定量PCR方法检测HsCAS1基因在蛇足石杉的根、茎、叶中的表达情况.序列分析表明,所克隆的HsCAS1基因编码区长为2,271 bp,编码756个氨基酸残基,HsCAS1与紫果冷杉(Abiesmagnifica)的CAS具有61％的序列相似性.生物信息学预测HsCAS1蛋白含有3个跨膜区,具有萜类环化酶等保守结构域,不合信号肽.HsCAS1在蛇足石杉的根中表达丰度高于茎和叶.本研究在国内外首次获得蛇足石杉HsCAS1基因的编码区序列,为进一步研究HsCAS1在石杉科植物甾醇合成途径中的功能及鉴定酶活性位点奠定基础.