Cofilin-1慢病毒载体的构建及其在Huh-7中的过表达

• 作者: 周敏 李宗海 石必枝 谢海龙 龙晓兰
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Cofilin-1 慢病毒载体 Huh-7细胞
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 65-69
• 分类号: R730.53|R734.2
• 字数: 4055字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2012.01.016

摘要

目的 构建Cofilin-1过表达的Huh-7细胞株. 方法 应用RT-PCR克隆出Cofilin-1的完整编码序列,将其亚克隆到慢病毒载体pWPT中,构建慢病毒载体表达质粒pWPT-Cofilin-1；将慢病毒表达质粒pWPT-Cofilin-1或pWPT-GFP与慢病毒包装质粒pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞,获得携带Cofilin-1完整编码序列的慢病毒和携带GFP基因的慢病毒,将两种慢病毒分别感染Huh-7细胞；通过Real-Time PCR和Western blot检测Huh-7细胞中的Cofilin-1的过表达情况. 结果 测序结果显示成功构建重组慢病毒表达质粒pWPT-Cofilin-1；慢病毒有效感染Huh-7细胞,依据GFP绿色荧光可测定感染有效率超过95％；Cofilin-1在Huh-7细胞中的mRNA量和蛋白水平都成功的过表达. 结论 本实验的完成,为进一步研究Cofilin-1基因在肝癌中的生物功能和作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周敏	上海交通大学附属仁济医院上海市肿瘤研究所	125	451	11.0	16.0
2	谢海龙	南华大学医学院肿瘤研究所	45	190	8.0	11.0
3	石必枝	上海交通大学附属仁济医院上海市肿瘤研究所	6	12	3.0	3.0
4	李宗海	上海交通大学附属仁济医院上海市肿瘤研究所	18	60	4.0	7.0
5	龙晓兰	南华大学医学院肿瘤研究所	3	6	2.0	2.0