S100A11慢病毒表达载体的构建及其在肝癌细胞中的表达

• 作者: 刘德勇 张庆丽 彭和人 谢海龙 龙晓兰
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: S100A11 Huh-7细胞 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 554-557,571
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3238字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建S100A11基因慢病毒表达载体,建立Huh-7 S100A11稳定细胞株,并鉴定其表达. 方法 RT-PCR扩增S100A11基因片段,与pWPT载体经Mlu Ⅰ和Not Ⅰ同时酶切后连接,构建慢病毒表达载体pWPT-S100A11;将表达载体pWPT-GFP和pWPT-S100A11与慢病毒包装质粒pMD2.G和psPAX2共同感染293T细胞,获得携带GFP和S100A11基因的慢病毒,将两种慢病毒分别感染Huh-7细胞,获得Huh-7 S100A11和Huh-7GFP稳定细胞株;利用Real-Time PCR和Western Blotting实验方法检测感染后S100A11的过表达情况. 结果 成功构建慢病毒表达载体pWPT-S100A11;慢病毒感染Huh-7细胞株后,阳性对照Huh-7GFP经荧光镜检测传染率达95％;感染Huh-7细胞后S100A11的mRNA和蛋白表达量均增加. 结论 成功构建慢病毒表达载体pWPT-S100A11,并建立了Huh-7S100A11稳定细胞株,为进一步研究S100A11基因在肝癌中的生物学功能和机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢海龙	南华大学肿瘤研究所	45	190	8.0	11.0
2	刘德勇	湖南环境职业技术学院病理教研室	26	7	1.0	2.0
3	张庆丽	湖南环境职业技术学院病理教研室	32	7	2.0	2.0
4	彭和人	湖南环境职业技术学院病理教研室	3	1	1.0	1.0
5	龙晓兰	南华大学肿瘤研究所	3	6	2.0	2.0