构建慢病毒载体介导RNA干扰沉默肝癌细胞Foxq1的表达

• 作者: 徐玉音 王桂兰 秦婧 陈莉
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒 Foxq1 RNA干扰 肝癌细胞株(7721细胞)
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 832-835,839
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7|R73-3
• 字数: 3672字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建慢病毒载体将Foxq1干扰序列递达到人肝癌7721细胞中,观察该细胞中Foxq1的表达并评估慢病毒载体的有效性.方法 体外合成与筛选具有Foxq1干扰功能的核酸片段(siRNA Foxq1),通过重组技术将其插入到慢病毒三质粒系统的转移质粒中,利用包装细胞(293T)将三质粒系统组装为完整的逆转录慢病毒颗粒,然后感染肝癌细胞.采用Western blot和RT-qPCR分别检测Foxq1蛋白和mRNA表达.同时构建与检测不含有siRNA Foxq1序列的直接三质粒系统包装的空病毒载体对照组.结果Foxq1-834-siRNA具有较强的抑制Foxq1 mRNA功能,其抑制效率达90.17%;基因测序证实体外合成的siRNA Foxq1基因序列成功插入到慢病毒转移质粒中;荧光显微镜观察证明肝癌细胞中持续表达Foxq1-834-siRNA的绿色荧光信号,且信号强度随时间推移逐渐增强;采用RT-qPCR和Western blot检测结果证实慢病毒载体感染的细胞中Foxq1 mRNA和蛋白表达量较对照组明显下降(P<0.001).结论 筛选到有效抑制Foxq1的siRNA Foxq1序列,通过构建慢病毒载体感染细胞能有效的将体外合成的siRNA Foxq1递达到癌细胞中,并能抑制癌细胞中Foxq1的表达,为进一步研究肝癌中Foxq1的功能提供有效的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈莉	南通大学医学院病理学系	161	548	10.0	16.0
2	秦婧	南通大学医学院病理学系	22	70	5.0	7.0
3	王桂兰	南通大学医学院病理学系	34	114	5.0	8.0
4	徐玉音	南通大学医学院病理学系	10	73	4.0	8.0