ERO1α慢病毒过表达载体的构建及其在RAW264.7细胞中稳定表达

• 作者: 刘婉洋 屈玉杏 戴安娜 胡佳慧 许显玉 陈风雷
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 慢病毒 ERO1α 过表达 RAW264.7细胞
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学·生物技术
• 页码范围: 89-93
• 页数: 5页
• 分类号: S-852
• 字数: 4342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2019.02.026

摘要

[目的]构建小鼠ERO1α基因慢病毒过表达载体, 并筛选其在RAW264.7细胞中稳定表达.[方法]利用PCR方法扩增ERO1α基因的CDS区并测序;将目的片段亚克隆到慢病毒过表达载体pCD513B-1上, 构建pCD513B-ERO1α慢病毒过表达载体;通过病毒包装产生慢病毒并转导RAW264.7细胞;转导后的细胞进行嘌呤霉素抗性筛选, 获得稳定表达的细胞;利用RT-qPCR和Western blot方法检测ERO1α的表达效果.[结果]ERO1α慢病毒过表达载体构建成功, 病毒滴度为5×106～10×106 TU/mL;慢病毒成功转导RAW264.7细胞并且稳定高表达.[结论]成功构建ERO1α慢病毒过表达载体, 并在RAW264.7细胞中稳定高表达, 为进一步研究ERO1α在免疫系统中的功能提供了技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈风雷	扬州大学兽医学院	3	4	1.0	2.0
5	许显玉	扬州大学兽医学院	2	3	1.0	1.0
9	胡佳慧	扬州大学兽医学院	2	0	0.0	0.0
10	戴安娜	扬州大学兽医学院	1	0	0.0	0.0
11	屈玉杏	扬州大学兽医学院	1	0	0.0	0.0
12	刘婉洋	扬州大学兽医学院	1	0	0.0	0.0