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目的:构建胆碱乙酰基转移酶(ChAT)过表达的慢病毒载体,转染小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7,上调细胞中ChAT表达.方法:利用PCR方法从小鼠cDNA文库中调取ChAT基因,克隆至pGC-FU慢病毒载体上,经PCR和测序鉴定.用pGC-FU-ChAT质粒转染RAW264.7后,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达,real-time PCR检测RAW264.7细胞中ChAT基因表达丰度.结果:融合表达GFP的慢病毒载体pGC-FU-ChAT感染RAW264.7细胞的效率可达80%以上,感染细胞ChAT基因表达大幅上调.结论:成功构建了携带ChAT基因的慢病毒载体,能有效感染RAW264.7细胞,细胞中ChAT基因过表达.
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文献信息
篇名 小鼠胆碱乙酰基转移酶慢病毒载体的构建及其在RAW264.7细胞中的表达
来源期刊 感染、炎症、修复 学科 医学
关键词 胆碱乙酰基转移酶 慢病毒 载体构建
年,卷(期) 2010,(4) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 200-203,封3
页数 分类号 R9
字数 2823字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1672-8521.2010.04.002
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研究主题发展历程
节点文献
胆碱乙酰基转移酶
慢病毒
载体构建
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
感染、炎症、修复
季刊
1672-8521
11-5225/R
16开
北京市海淀区阜成路51号
2000
chi
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1943
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